商品詳情
【培養(yǎng)條件】
McCoy's 5a(CellCook cat:CM2002,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
McCoy's 5a(CellCook cat:CM2002,或同配方)
血清:
南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)
【傳代比例】
不高于1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化3-5分鐘
【換液頻率】
每周換液2-3次
【凍存液配方】
MCCOY'S 5A+10%FBS+10%DMSO
【難度等級】
++
【培養(yǎng)要點】
完全攤開需1天
【特征特性】
這株細胞是1970年由TREMPE G和OLD LJ從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。該細胞亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒、肝糖原顆粒、大溶酶體、成束的細胞質(zhì)纖絲;過表達HER2/C-ERB-2基因產(chǎn)物。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細胞基因組,使細胞表達熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進行觀察,標(biāo)記后的細胞非常容易進行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性,為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期(一個月2-3次或頻率自定)用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。