空泡化的原因有哪些？能說明細胞狀態(tài)差嗎？
細胞空泡如圖所示1
細胞空泡化是什么？
細胞質空泡化（cytoplasmic vacuolization）是2019年公布的感染病學名詞。變性細胞的胞質、胞核內出現(xiàn)大小不一的空泡(水泡)，細胞呈蜂窩狀或網(wǎng)狀。變性嚴重的細胞，胞質內小空泡相互融合成大空泡，細胞核懸于中央，或被擠于一側，細胞形體顯著腫大，胞質空白，外形如氣球狀。
胞質空泡化可以是可逆的，也可以是不可逆的?？赡娴陌|空泡化通常只是在暴露于誘導劑后能觀察到，這種胞質空泡化可以引起細胞狀態(tài)的改變或者細胞周期停滯。而不可逆的胞質空泡化會導致細胞死亡，許多自然或者人工合成的化合物以及被細菌或者病毒感染后均會出現(xiàn)不可逆的胞質空泡化，因此出現(xiàn)這種情況，細胞便不可再用于后續(xù)的實驗中。
細胞空泡如圖所示2
細胞空泡如圖所示3
細胞空泡如圖所示4
細胞空泡如圖所示5
細胞空泡化的原因有哪些？
原代細胞培養(yǎng)的過程中，隨著傳代次數(shù)的增加，部分細胞進入終末分化狀態(tài)，喪失分裂能力，隨之空泡化而死亡；永生化的細胞系，當細胞傳代次數(shù)過多時，也會出現(xiàn)老化的現(xiàn)象。
當細胞培養(yǎng)基滲透壓或pH改變，或培養(yǎng)基的pH值與細胞正常所需pH值差別太大等情況時，細胞生長收到刺激，容易發(fā)生空泡化。
當胰酶消化時間過長，會導致細胞損傷；或者在消化過程中，過度吹打、吹打時產(chǎn)生大量氣泡，都容易誘發(fā)細胞空泡的產(chǎn)生。
在細胞培養(yǎng)過程中，血清質量/濃度、藥物或外界刺激等均可導致內質網(wǎng)應激，從而產(chǎn)生空泡。
當細胞缺乏營養(yǎng)處于饑餓狀態(tài)，也會自噬從而產(chǎn)生空泡，但是自噬小體僅能在電鏡下觀察到。
支原體嚴重污染時，會導致細胞狀態(tài)變差，空泡化，細胞膜上也會出現(xiàn)小黑點附著；病毒感染也可能會導致空泡的產(chǎn)生。
那遇到細胞空泡化我們應該如何解決？
1
細胞老化，可以通過復蘇代數(shù)靠前的細胞進行培養(yǎng)。
2
培養(yǎng)基滲透壓及pH值，可以通過更換合適的培養(yǎng)基，調整到合適的滲透壓及pH值，再進行培養(yǎng)。
3
在傳代時，要選用合適濃度的胰酶和選取適當?shù)南瘯r間進行消化，在操作時要避免吹打過度產(chǎn)生大量氣泡。
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要保證細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)充足，可以通過增加血清濃度和在培養(yǎng)基中加入谷氨酰氨解決。
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盡量使用質量好和渠道正規(guī)的胎牛血清，因為這樣的血清營養(yǎng)豐富且外源刺激因子少，可以有效地避免出現(xiàn)這類問題。
6
在細胞培養(yǎng)時要嚴格進行無菌操作，注意操作規(guī)范，減少污染。定期檢測細胞是否存在支原體污染的情況，如果存在支原體污染需及時清除，避免影響細胞狀態(tài)。
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