SK-BR-3(人乳腺癌細(xì)胞)是1970年由TREMPE G和OLD LJ從一位43歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離得到的。該細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒、肝糖原顆粒、大溶酶體、成束的細(xì)胞質(zhì)纖絲;過(guò)表達(dá)HER2/C-ERB-2基因產(chǎn)物。


本文為大家介紹SK-BR-3細(xì)胞生長(zhǎng)特性和常見(jiàn)問(wèn)題解決策略。
一、培養(yǎng)條件
【培養(yǎng)體系】MCCOY'S 5A(CELLCOOK CAT:CM2002) 10%胎牛血清(南美進(jìn)口級(jí)別)
【疾病】乳腺腺癌
【傳代比例】不高于1:3傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】消化2-3分鐘
【換液頻率】每周換液2-3次
【凍存液配方】MCCOY'S 5A+10%FBS+10%DMSO
二、生長(zhǎng)特性
SK-BR-3細(xì)胞在復(fù)蘇培養(yǎng)的第一周以及后續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中都會(huì)出現(xiàn)松散貼壁和漂浮等情況。


SK-BR-3細(xì)胞復(fù)蘇后恢復(fù)正常生長(zhǎng)狀態(tài)需要一定時(shí)間,可能會(huì)出現(xiàn)不貼壁漂浮的情況,這是正?,F(xiàn)象。
復(fù)蘇后幾天內(nèi)最好保持細(xì)胞不受干擾;在剛收到細(xì)胞時(shí),可根據(jù)細(xì)胞密度進(jìn)行傳代,傳代后3天若培養(yǎng)基無(wú)明顯變化不要處理細(xì)胞,減少挪動(dòng)。
如果仍然有很多漂浮物,可將漂浮的活細(xì)胞收集起來(lái),通過(guò)輕輕離心保留漂浮細(xì)胞,并在更換培養(yǎng)基時(shí)將其與附著的細(xì)胞一起添加回同一培養(yǎng)容器中,不要分離或丟棄漂浮細(xì)胞。
細(xì)胞最初會(huì)以小團(tuán)塊的形式附著,許多細(xì)胞團(tuán)仍處于懸浮狀態(tài),幾天后,細(xì)胞將貼壁生長(zhǎng)并向外延伸,有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)一些細(xì)胞碎片,通過(guò)換液可去除。
三、注意事項(xiàng)
● 完全攤開(kāi)需1天。
● 細(xì)胞傳代不可過(guò)稀,1:3傳代生長(zhǎng)一代需5-6天。
● SK-BR-3細(xì)胞有聚團(tuán)生長(zhǎng)特性,匯合度達(dá)到70%-90%即可傳代,如果細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng),就會(huì)分離漂浮。
● 若有大量漂浮的活細(xì)胞可以收集重新接種,切勿丟棄。