■ H9C2細胞由KIMES B和BRANDT B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到；表現(xiàn)出許多骨骼肌的特性。

■ 這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應。

■ 如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，融合很快發(fā)生。

本文為大家介紹H9C2的培養(yǎng)條件及注意事項
 

一、培養(yǎng)條件

■ 生長特性：貼壁

■ 形態(tài)特征：成纖維細胞樣

■ 培養(yǎng)條件：DMEM(改良型) +10%胎牛血清(進口南美級別）

■ 傳代比例：1:3傳代（培養(yǎng)面積比）

■ 傳代方式：消化1分30秒

■ 換液頻率：2~3天換液1次

■ 凍存液配方：DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO

■ 培養(yǎng)要點：建議使用改良型DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)

二、常見問題

01

為什么會出現(xiàn)空泡？

可能是鋪板時鋪得不夠均勻，局部過于密集，密集地方的細胞狀態(tài)會變差、空泡增多。也可能是血清品質較差，要更換優(yōu)質血清，及時換液

02

為什么細胞長得慢？

a

細胞密度低或細胞鋪得不均勻，細胞長不起來，可以先培養(yǎng)，然后消化重新種瓶，提高密度培養(yǎng)或直接重新消化接種培養(yǎng)。

b

操作時力度沒控制好，力度過大將細胞吹碎，狀態(tài)變差。

c

血清品質較差，影響細胞生長，建議更換高品質血清。

03

H9C2細胞狀態(tài)差，容易漂？

a

可能是血清問題，建議換高品質血清，并注意血清要程序解凍，不能水浴化開；

b

也有可能是細胞沒鋪勻，局部生長密集，需要及時傳代，并不是細胞長滿才傳代，當有個別地方長得過于密集，容易疊加的時候應該就要傳代了。

參考文獻

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DOI：10.1186/s13287-020-1563-8    (此文獻H9C2細胞購自賽庫生物）