是指在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，部分細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，部分細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)，稱為貼壁懸浮混合型細(xì)胞。
LLC（小鼠Lewis肺癌細(xì)胞）、BV2（小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞）、PC3（人前列腺癌細(xì)胞）、NR8383（大鼠肺泡巨噬細(xì)胞）、SP2/0-Ag14（小鼠骨髓瘤細(xì)胞）、COLO 205（人結(jié)腸癌細(xì)胞）等。
圓形細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，不規(guī)則型細(xì)胞為貼壁細(xì)胞。
大部分圓形懸浮細(xì)胞，少量圓形貼壁細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)
補(bǔ)液/換液
補(bǔ)液：細(xì)胞量較少時(shí)直接補(bǔ)加1-2mL新鮮的完全培養(yǎng)基即可。
換液：細(xì)胞量較多但不夠傳代時(shí)，2-3天離心換液一次。
用移液槍吸出培養(yǎng)液（含懸浮的細(xì)胞）轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管中；
貼壁部分：用1mL PBS洗細(xì)胞，吸出PBS放入到第1步裝有培養(yǎng)液的離心管中收集（不要直接丟棄，里面有細(xì)胞）；
加入1mL 0.25%胰酶EDTA溶液，傾斜晃勻，吸去大部分胰酶，覆蓋所有細(xì)胞后置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化，具體消化時(shí)間參考說(shuō)明書結(jié)合細(xì)胞生長(zhǎng)情況而定。
顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，細(xì)胞皺縮變圓后，傾斜培養(yǎng)瓶，細(xì)胞呈流沙狀完全脫落，即可判斷細(xì)胞消化完成。
用2mL完全培養(yǎng)基終止消化，沿瓶壁將細(xì)胞輕柔吹落，均勻吹散。將消化下來(lái)的細(xì)胞懸液吹散細(xì)胞后收集到第1步的離心管；
將離心管在1000rpm 5min離心，離心完畢棄掉上清，加入新鮮的完全培養(yǎng)基重懸，按實(shí)際情況分瓶，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)
在操作過(guò)程中，每丟棄一個(gè)液體前都要想一下里面有沒(méi)有可能有細(xì)胞，避免丟失細(xì)胞。
細(xì)胞種類、細(xì)胞密度、細(xì)胞狀態(tài)、甚至胰酶的品牌，均影響到細(xì)胞的消化時(shí)間，所以消化的時(shí)候不要只看時(shí)間，以顯微鏡下細(xì)胞的狀態(tài)來(lái)確定消化終點(diǎn)，部分難消化的細(xì)胞消化時(shí)間甚至可以長(zhǎng)達(dá)15分鐘。
細(xì)胞的傳代比例通常說(shuō)的是等體積的容器，不同容器需要換算；例如：一個(gè)T25培養(yǎng)瓶的細(xì)胞傳到一個(gè)10cm培養(yǎng)皿里面，雖然是1傳1，但是比例可不是1:1；T25瓶底面積25cm²，10cm培養(yǎng)皿底面積約為55cm²（10cm的培養(yǎng)皿指的是培養(yǎng)皿的外徑，而培養(yǎng)皿的內(nèi)徑約為8.4cm，故根據(jù)內(nèi)徑可求出其底面積為55cm²），所以實(shí)際傳代比例為1:2.2。
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